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WORKFLOW CELLULARE: SOLUZIONI DALLA PREPARAZIONE ALLA CONSERVAZIONE
L’obiettivo del workflow cellulare è quello di avere una coltura cellulare che sia adeguata per il numero di cellule e per la qualità delle cellule stesse. È necessario effettuare tutti i passaggi di coltura, preparazione e conservazione, in un ambiente che rispetti determinate condizioni di crescita, in modo da poter effettuare le successive analisi del campione senza avere incognite riguardo alla qualità del campione analizzato.
Le colture cellulari vengono utilizzate nella ricerca come modello sperimentale in innumerevoli tipi di esperimenti. Svolgono un ruolo fondamentale in diverse applicazioni:
- analisi dell’effetto dei farmaci;
- verifica della mutagenicità e cancerogenicità delle sostanze;
- studio dell’espressione genica;
- produzione di OGM, organismi geneticamente modificati;
- produzione di anticorpi monoclonali;
- produzione proteine ricombinanti;
- produzione vaccini;
- studio della risposta immunitaria;
- studio dei processi di base delle cellule (replicazione, morte cellulare programmata, necrosi, produzione di energia, duplicazione del DNA).
QUALI STRUMENTI SERVONO NEL WORKFLOW CELLULARE
Fase 1: Preparazione
CAPPE A FLUSSO LAMINARE
- manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
- ambiente di lavoro pulito per le cellule
- operatore protetto dagli aerosol
- provviste di filtri HEPA
- sospensione delle cellule
- miscela dei reagenti di un test
- miscela di un campione sperimentale e un diluente
SHAKER ORBITALI
- agitazione e miscelazione
- scongelamento delle criovials contenenti le cellule d’interesse
SISTEMI PER LA PRODUZIONE DELL’ACQUA
- produzione di acqua di tipo I e II per le soluzioni necessarie in laboratorio
CENTRIFUGHE
- raccolta del campione
- sterilizzazione di soluzioni, brodi di coltura per batteri, puntali, etc.
PIPETTE E PIPETTATORI
- sterili e monouso
- manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro
Fase 2: Coltura e crescita
CAPPE A FLUSSO LAMINARE
- manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
- ambiente di lavoro pulito per le cellule
- operatore protetto dagli aerosol
- provviste di filtri HEPA
BIOREATTORI
- produzione su scala pilota
- produzione su scala produttiva
CENTRIFUGHE
- raccolta del campione
- coltivazione delle cellule di mammifero
- coltivazione delle cellule batteriche statiche
- dotazione opzionale di sistema di refrigerazione
-
INCUBATORI CON AGITAZIONE
- coltivazione colture batteriche o di cellule di insetto
- manipolazione campioni di ricerca in ambiente sterile
PIPETTE E PIPETTATORI
- sterili e monouso
- manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro
-
Fase 3: Raccolta
CAPPE A FLUSSO LAMINARE
- manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
- ambiente di lavoro pulito per le cellule
- operatore protetto dagli aerosol
- provviste di filtri HEPA
- gravità fino a 25.000xg con volumi medio-piccoli
- preparazione di campioni in coltura cellulare, per protocolli di chimica clinica e per la centrifugazione di micropiastre
ULTRACENTRIFUGHE
- gravità fino a 1.000.000xg con volumi piccoli
- centrifughe in grado di raggiungere elevatissimi valori di accelerazione di gravità, idonee per la separazione, preparazione e purificazione dei campioni
-
- gravità fino a 100.000xg con volumi medi
- centrifughe da pavimento ad alta capacità, in grado di processare fino a 4 o 6 litri
-
CENTRIFUGHE DA BIOPROCESSO
- gravità fino a 10.000xg con volumi grandi
- sviluppo e implementazione di metodi di bioprocesso di raccolta, separazione e purificazione ad alta qualità che richiedono riproducibilità e tracciabilità corsa dopo corsa
PIPETTE E PIPETTATORI
- sterili e monouso
- manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro
-
Fase 4: Analisi
LAVATORI DI MICROPIASTRE
- automatizzazione e ottimizzazione della riproducibiltà delle diverse fase di lavaggio
- a strip o a piastra completa
LETTORI MULTI-MODE: Gestione delle letture in
- assorbanza
- fluorescenza
- luminescenza
-
ANALIZZATORI DEL METABOLISMO CELLULARE
- analisi in tempo reale del processo metabolico delle cellule in vivo
- misurazione consumo di ossigeno
- misurazione acidificazione cellulare
- dispensazione di campioni/reattivi
- ottenimento di immagini delle cellule in tempo reale
LETTORI SINGLE MODE
- coltivazione delle cellule batteriche statiche
- rilevazione, identificazione e conteggio di specifiche cellule/particelle all’interno di una popolazione cellulare/sospensione di materiale biologico
- identificazione strutture intracellulari
- studiare processi biologici, sia fisiologici che patologici
-
Fase 5: Conservazione
FRIGORIFERI +4°C, CONGELATORI -20°C, -30°C, -35°C, -40°C, FRIGOCONGELATORI +4°C, -20°C
- conservazione di reagenti, terreni di coltura, DNA, vaccini, farmaci, etc.
ULTRACONGELATORI -80 °C
- conservazione a lungo termine di DNA, RNA, ceppi batterici, vaccini, etc.
CONGELATORI MECCANICI -150 °C
- stoccaggio a bassissime temperature, in alternativa allo stoccaggio in azoto liquido, di linee cellulari e materiale sensibile
CONGELATORI A DISCESA PROGRAMMATA
- preparazione dei campioni cellulari prima della conservazione criogenica, garantisce la massima vitalità delle cellule, secondo procedure standardizzate e ripetibili
CONTENITORI DI AZOTO
- sistemi di stoccaggio in vapori d’azoto per conservazione a lungo termine delle cellule.
- disponibili in diverse capacità, a riempimento manuale o automatico
- monitoraggio 24/7 di temperatura e altre grandezze chimico-fisiche
- tecnologia LoRaWAN
-
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